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表达鸡白细胞介素1β基因重组鸡痘病毒的构建

邵卫星， 卢建红， 刘玉良， 韦栋平， 彭大新， 刘秀梵

（扬州大学 农业部畜禽传染病学重点开放实验室， 江苏 扬州225009）

摘要：从伴刀豆球蛋白(ConA)刺激的鸡脾细胞中扩增出鸡白细胞介素1β（ChIL1β）编码区基因，通过与GenBank上登录的ChIL1β序列（Y15006）进行比较。结果显示，在ChIL1β基因编码区的104位、306位、387位和432位的核苷酸发生了变化；相应的氨基酸在35位也发生了变化。虽然306位、387位和432位的核苷酸发生了变化，但没有引起氨基酸变化，说明这一区域的氨基酸具有一定的保守性。从氨基酸的性质上看，35位（Asp→Ala）由酸性氨基酸变为中性氨基酸，这可能是同一种属的不同品种间的正常变化。以鸡痘病毒（FPV）为活载体，构建了表达ChIL1β的重组鸡痘病毒rFPVIL1β。应用XTT/PMS方法检测rFPVIL1β感染的成纤维细胞72h后表达ChIL1β的生物活性，效价为1.0×105U/mL，证明FPV能有效地表达ChIL1β。

关键词： 白细胞介素1β； 鸡痘病毒； 生物活性

中图分类号：S 852.659.1  文献标识码： A  文章编号：1000-6419(2004)01-0012-05

Construction of recombinant fowlpox virus expressing chicken IL1β gene
SHAO Weixing， LU Jianhong， LIU Yuliang，
WEI Dongping， PENG Daxin， LIU Xiufan

Key Laboratory of Domestic Animal and Poultry Lemology, Ministry of Agriculture/Yangzhou University, Yangzhou 225009, China)

Abstract: The cDNA of the chicken interleukin1β (ChIL1β) was cloned from ConAstimulated chicken spleen cells by RTPCR. Compared with the published ChIL1β sequence in the GenBank(accession No.Y15006), nucleotide changes in the cloned ChIL1β sequence were found at nt 104(A→G）,306(C→T),387（G→T）and 432（C→A）. And the corresponding change of amino acid was found at amino acid 35 （Asp→Ala） of putative polypeptide. The nucleotide variation at nt 306（C→T）,387（G→T）and 432（C→A） did not result in amino acid change. Then a recombinant fowlpox virus(rFPV) expressing ChIL1β was constructed and the biologic activity of the recombinant ChIL1β expressed by rFPV in chicken embryo fibroblasts in vitro using XTT/PMS was determined. The result demonstrated that FPV can express effectively ChIL1β.

Key words: interleukin1β (IL1β)； fowlpox virus； biologic activity

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